從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中進行miRNA和總RNA的純化
上海金畔生物科技有限公司提供凱杰Qiagen 石蠟包埋組織miRNA和總RNA純化試劑盒 miRNeasy FFPE Kit (50) 217504,品質保證,價格優惠,全國聯保,歡迎咨詢。
有效純化miRNA和總RNA
創新方法用于克服福爾馬林造成的交聯
有效釋放RNA而不會破壞其完整性
85分鐘流暢的操作得到RNA
miRNeasy FFPE Kit確保從福爾馬林固定、石蠟包埋(FFPE)的組織切片中純化含約18個核苷酸以上的總RNA。試劑盒能夠回收可用的RNA片段,包括miRNA和其他小RNA,用于定量real-time RT-PCR等下游應用。
Performance
使用miRNeasy FFPE Kit純化的總RNA和miRNA的產量和性能優于采用其他方法純化的miRNA,如使用苯酚-氯仿抽提或者其他供應商的類似試劑盒(參見”Effective real-time RT-PCR quantification”、”Efficient RNA purification from FFPE tissues”和”Superior yields and performance”)。
Principle
用福爾馬林固定的組織導致RNA-RNA和RNA-蛋白質交聯,從而影響了RNA在下游應用中的表現。miRNeasy FFPE Kit提供了獨特的裂解和孵育條件,可逆轉福爾馬林對RNA造成的交聯。特別研制的的裂解緩沖液有效地將RNA從組織切片中釋放出來,同時避免了RNA的進一步降解。裂解產物用DNase消化,然后優化的結合條件能夠純化含約18個以上核苷酸的所有可用的RNA。
Procedure
所有的miRNeasy FFPE操作流程都可在85分鐘之內完成。優化的裂解緩沖液能夠用蛋白質酶K消化樣本裂解產物,僅需15分鐘而且不損耗RNA產量。裂解后,在80°C下孵育樣本15分鐘逆轉福爾馬林交聯。然后,在優化的DNase消化步驟中,用DNase Booster Buffer快速去除基因組DNA,并且用RNeasy MinElute離心柱純化濃縮的RNA(參見”miRNeasy FFPE procedure”)。由于RNA的洗脫體積僅有14–30 μl,在下游應用中可實現較小的反應體積。
Applications
miRNeasy FFPE Kit能夠純化包含miRNA的總RNA,并且適用于多種下游應用,如定量real-time RT-PCR。
Features
Specifications
應用
PCR, qPRC, real-time RT-PCR, microArray
洗脫體積
14-30 μl
規格
Spin column
主要樣本類型
FFPE tissue samples
處理
Manual (protocol for automated processing on QIAcube available)
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
miRNA, total RNA
樣本量
up to 4 sections, each with a thickness up to 10 μm and a surface area up to 250mm^2 (automated protocol on QIAcube: up to 2 sections)
技術
Silica technology
產量
Varies
應用
PCR, qPRC, real-time RT-PCR, microArray