供應TdB品牌DSS –小鼠結腸炎造模

供應TdB品牌DSS –小鼠結腸炎造模

硫酸葡聚糖鈉鹽(DSS)結腸炎造模經常遇到,但確切機制不是很清楚,一般認為腸上皮單層細胞受DSS損傷后,免疫系統受到腸道微生物其代謝物不斷刺激,產生炎癥。在此簡單介紹一下造模步驟(小鼠)。

1. 選擇8-10周齡的實驗小鼠,稱重(理想重量 在20g左右),打孔標記。將DSS充分溶解在高溫滅菌水中,濃度按實驗需求配制。
2. 如果是損傷/治療恢復造模,可將 DSS 配制為2%,如果是急性結腸炎造模,可以選擇3%。喂飼量為 100ml/籠(4-5只小鼠),無論有無剩余,每隔2天必須換新配的DSS。
3. 損傷/恢復造模一般是連續喂飼2%DSS 7天,然后再換為清水飼養7天。實驗人員也可以根據自己的實驗內容進行調整(如不涉及到恢復,可以7天后就處理小鼠,如需要觀察長期炎癥可以多喂養幾天)急性結腸炎造模,小鼠可能堅持不到7

天。無論哪種造模,實驗人員應從第一天起,記錄小鼠的體重、糞便出血情況、外觀、行為等。

4. 小鼠的體重一般是從飼養DSS第6天開始下降,恢復喂養清水3天左右體重開始增加。當然這不是絕對的,小鼠的基因型,飼養條件也會影響。在處理小鼠前,千萬不要違背實驗動物倫理規定,如體重過低,便血非常嚴重等,要不然文章中不好交待。
小鼠處理后,測量記錄結腸尺寸(會變短,膨脹),一部分儲存到液氮中用于后續的基因分析,一部份保存在福爾馬林中用于組織學分析。
DSS 可以選瑞典TDBcons的產品,Mw: 35-55KDa
◆硫酸葡聚糖>DSS>誘導腸炎模式動物的優點
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潰瘍性結腸炎(UC)是一種病因和發病機制尚不十分清楚的慢性腸道炎癥性疾病,建立適當的結腸炎動物模型對于研究UC的病因、發病機制以及新的治療方法具有重要意義。人們制作了多種動物模型對其進行研究,日本學者于1985年首次應用硫酸葡聚糖制備了鼠UC模型,此后,該方法廣泛用于篩選治療炎癥性腸病(IBD)的新方法和臨床前新藥物的開發,也用于研究IBD的發病機制。其具備以下優點:
◆參考方法
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方法一:
小鼠給予含50g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸鈉)5000或40000的蒸餾水自由飲用7d,出現體重減輕、腹瀉、血便等急性腸炎的表現.病理學切片HE染色發現小鼠病變結腸腺體結構紊亂,黏膜和黏膜下單核細胞和多核細胞浸潤.DSS組病變腸段組織GSH表達較對照組明顯減少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病變結腸分泌的IL-4明顯升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),IFN-g輕度降低(P>0.05).
資料來源:《GSH在DSS誘導的小鼠實驗性腸炎中的作用》
方法二:
將分子量為50 00或40000的DSS溶于飲用水,配成3% DSS溶液,讓BALB/C小鼠自由飲用7d,建立小鼠急性結腸炎模型;②讓BALB/C小鼠自由飲用3% DSS溶液7d,然后飲用不含DSS蒸餾水14d,建立小鼠慢性結腸炎模型;模型建立成功的標志為飲用3% DSS 7 d后出現半稀便、腹瀉、大便隱血(+)和肉眼血便中的任一癥狀。
資料來源:《葡聚糖硫酸鈉致小鼠結腸炎模型的建立與評價》。
已有研究表明,不同分子量的DSS所誘導的病變特征不同,如用5000, 40,000和500,000的DSS喂養小鼠,結果典型病變只出現于5,000組和40,000組,50,000組的病變主要見于盲腸和上段結腸,此外,DSS結腸炎的嚴重度并不依賴于DSS攝入量,而是由DSS濃度決定,小鼠飲用的DSS量差別較小時不影響誘導出的結腸炎嚴重度。再次,不同種屬對于不同分子量的DSS的敏感度不一。